在《圣经》中幼发拉底河称为伯拉河。 《圣经》最早提到幼发拉底河是在创世纪第二章——它是继比逊河（Pishon）、基训河（Gihon）及底格里斯河之后，第四条从伊甸园流出来的河流。幼发拉底河亦是上帝允诺赐予亚伯拉罕及其后人的土地（迦南）的边界之一。
1、在当时，幼发拉底河并未与底格里斯河合流，而是直接流入波斯湾。
2、后来由于河水带来的沙泥把河床不断填高，最终使两河的河口不断南移，最终合流在一起。
3、根据圣经启示录所指，当到了世界末日，幼发拉底河将会干涸，为哈米吉多顿（Armageddon）作准备。
